Lady Macbeth: Esposa y cómplice de Macbeth. Es una mujer despiadada y ambiciosa que incita a Macbeth a matar al rey Duncan. Después del asesinato, Lady Macbeth se siente atormentada por la culpa y el remordimiento, y finalmente muere en un estado de locura.
Rey Duncan: El Rey de Escocia al inicio de la obra. Es un gobernante amable y benevolente, y su asesinato a manos de Macbeth pone en marcha los trágicos acontecimientos de la historia.
Banquo: Compañero general y amigo cercano de Macbeth. Sospecha de la participación de Macbeth en el asesinato del rey Duncan y finalmente se convierte en víctima de la paranoia de Macbeth.
Las Tres Brujas: Tres figuras sobrenaturales que profetizan que Macbeth se convertirá en rey. Sus profecías ponen en marcha los acontecimientos de la obra y se utilizan como símbolo del destino y las consecuencias de la ambición.
Macduff: Un noble escocés que se opone al gobierno de Macbeth y eventualmente lidera las fuerzas que lo derrocan.
Malcolm y Donalbain: Los hijos del rey Duncan. Malcolm huye a Inglaterra tras el asesinato de su padre y finalmente regresa a Escocia para liderar un ejército contra Macbeth. Donalbain también huye de Escocia después del asesinato, pero no juega un papel importante en el resto de la obra.
Hécate: La diosa de la brujería y la magia. Ella aparece en el Acto III de la obra y ordena a las brujas que cumplan sus órdenes.