Las primeras actuaciones de la compañía se llevaron a cabo en The Theatre y The Curtain, dos teatros en Shoreditch, en las afueras de la ciudad de Londres. En 1599, la compañía se trasladó al recién construido Globe Theatre en la orilla sur del Támesis, que se convirtió en su sede principal.
Los hombres de Lord Chamberlain eran conocidos por su talentoso conjunto de actores, incluido Burbage, considerado uno de los mejores actores de su tiempo. Kempe era un actor cómico de renombre, mientras que Heminges era conocido por su interpretación de papeles trágicos. Se cree que el propio Shakespeare actuó en algunas de sus obras, aunque no se conocen con certeza los papeles exactos que desempeñó.
El repertorio de la compañía incluía una amplia variedad de obras de teatro, desde comedias e historias hasta tragedias y romances. Las obras de Shakespeare formaron una parte importante del repertorio de la compañía, y muchas de sus obras, incluidas "Hamlet", "Otelo" y "El rey Lear", fueron representadas por primera vez por Lord Chamberlain's Men.
La compañía también realizó numerosas giras por Inglaterra, actuando en varios pueblos y ciudades. Esto ayudó a difundir las obras de Shakespeare y la popularidad del teatro más allá de Londres.
En 1603, tras la muerte de la reina Isabel I y el ascenso del rey Jaime I, la empresa recibió una patente real y pasó a ser conocida como los Hombres del Rey. Continuaron actuando en el Globe Theatre hasta que fue destruido por un incendio en 1613. Después de la destrucción del Globe, la compañía se trasladó al Blackfriars Theatre, donde actuaron hasta que la Guerra Civil Inglesa cerró todos los teatros en 1642.
A pesar de los desafíos y cambios que enfrentaron a lo largo de los años, la compañía de actores de Shakespeare jugó un papel fundamental en el desarrollo y el éxito del teatro renacentista inglés. Sus representaciones de las obras de Shakespeare ayudaron a establecerlo como uno de los mejores escritores de todos los tiempos.